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GB 7919-1987.Procedures and mothods of safety evaluatlon for cosmetles.

5.1急性皮膚毒性試驗

人體接觸化妝品主要途徑是皮膚。當(dāng)評價化妝品及其成分對人體健康的可能危害時，進行皮膚毒性的研究是必不可少的。

5.1.1目的:確定受試物能否經(jīng)皮膚滲透和短期作用所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)，并為確定亞慢性試驗提供實驗依據(jù)。

5.1.2 定義:系指受試物涂敷皮膚一次劑量后所產(chǎn)生的不良反應(yīng)。

劑量表示方法:以敷用受試物的質(zhì)量(8、mg)或以實驗動物平均單位體重敷用受試物的質(zhì)量(mg/.kg)來表示。

一次敷用受試物引起50%受試動物死亡的劑量，稱之為半數(shù)致死量(LD50)。 LD50 值的單位為mg或g/kg體重。

5.1.3動物的準備:選用兩種性別成年大鼠、豚鼠或家兔均可。建議試驗起始動物體重范圍為大鼠200~ 300g,豚鼠350~ 450g,家兔2. 0~3.0kg。

實驗動物應(yīng)在動物籠內(nèi)觀察3~5天,使其適應(yīng)環(huán)境,并觀察其健康狀況。

正式給藥前24h,將動物背部脊柱兩側(cè)毛發(fā)剪掉或剃掉，注意不要擦傷皮膚，因為損傷能改變皮膚的滲透性,受試物涂抹處,不應(yīng)少于動物體表面積的10%。各類動物體表面積計算方法見附錄A.

5.1.4受試物的配制:若受試物是固體，應(yīng)磨成細粉狀,并用適量水或無毒無刺激性賦形劑混勻,以保證受試物與皮膚良好的接觸。常用的賦形劑有橄欖油、羊毛脂、凡士林等。若受試物是液體，一般不必稀釋。

5.1.5劑量和分組:將兩種性別的實驗動物分別隨機分為5~6組,若用賦形劑,需設(shè)賦形劑對照組?；瘜W(xué)物質(zhì)毒性的半數(shù)致死量(LD50)計算方法見附錄B.

機率單位-對數(shù)解法，每組較好10只動物。各劑量組間要有適當(dāng)?shù)慕M距，以使各劑量組產(chǎn)生一系列的毒性反應(yīng)或死亡率。較高劑量可達2000mg/kg.

5.1.6試驗方法:將受試物均勻地涂敷于動物背部,并用油紙和兩層紗布覆蓋，再用無刺激性膠布或繃帶加以固定，以防脫落和動物舔食受試物，共敷藥24h。試驗結(jié)束后，可用溫水或適當(dāng)?shù)娜軇┣宄龤埩舻氖茉囄铩?般觀察一周,若給藥4天后仍有動物死亡時,仍需繼續(xù)觀察--周。給藥后注意觀察動物的全身中毒表現(xiàn)和死亡情況,包括動物皮膚、毛發(fā)、眼睛和粘膜的變化，呼吸、循環(huán)、自主和中樞神經(jīng)系統(tǒng)、四肢活動和行為方式等的變化，特別要注意觀察震顫、驚厥、流涎、腹瀉、嗜睡、昏迷等現(xiàn)象。

凡是試驗過程中死亡的動物和/或有毒性反應(yīng)的動物,均應(yīng)進行尸檢和肉眼觀察。當(dāng)肉眼可見病變時,還應(yīng)進行病理組織學(xué)鏡檢。

5.1.7結(jié)果評價: 急性毒性分級標準詳見附錄C。

5.2急性經(jīng)O毒性試驗

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