GB/T 33309-2016.Determination of vitamin B。( pyridoxine , pyridoxine hydrochloride,pyridoxine fatty acid esters and pyridoxal 5-phosphate ) in cosmetics-High performance liquid chromatography.
4.13鹽 酸溶液(5.0 mol/L,0.1 mol/L):量取40 mL、0.8 mL鹽酸(4.9)分別放人兩個100 mL容量瓶中,用水定容,分別得5.0 mol/L.0.1 mol/L鹽酸溶液。
4.14氫氧化鈉溶液(5.0 mol/L,0.1 mol/L) :稱取20 g.0.4 g氫氧化鈉用水溶解,分別放入兩個100 mL容量瓶中,用水定容,分別得5.0 mol/L、0.1 mol/L氫氧化鈉溶液。
4.15離子對 試劑緩沖溶液[0.02 mol/L磷酸二氫銨緩沖溶液(含0.001 mol/L七氟丁酸)];稱取2.30 g磷酸二氫銨，加入約980 mL水溶解,用30%磷酸(4.11)或30%氨水(4.12)調(diào)節(jié)pH值至4.5,加入170 μ七氟丁酸(4.2),用水定容至1 L備用。
4.16磷酸氫二鈉溶液(0.1 mol/L) :稱取17.8 g磷酸氫二鈉(4.7),用水溶解,定容至1 000 mL,用氫氧化鈉溶液(4.14)調(diào)節(jié)pH值至9.8,備用。
4.17堿性磷酸酶溶液(1.0g/L):稱取50mg堿性磷酸酶,用水定容至50mL.臨用前配制。
4.18標準樣品:吡哆素和吡哆醛,純度不小于99.0%。維生索B,(吡哆素、鹽酸吡哆素、吡哆索脂肪酸酯和吡哆醛5-磷酸酯)的CAS號、分子式、相對分子質(zhì)量、化學(xué)結(jié)構(gòu)式參見附錄A. .
4.19維生素 B。(吡哆素、吡哆醛)標準貯備液(1 mg/mL):準確稱取0.025 g(精確至0.000 1 g)吡哆素、吡哆醛標準品,分別置于25 mL容量瓶中,用水溶解定容,配制成濃度為1 mg/mL的標準儲備液，于4 C避光保存,有效期3個月。
4.20維生素B,(吡哆素、吡哆醛)混合標準中間液1(100μg/mL)、混合標準中間液2(10μg/mL):分別準確吸取維生素B, 標準貯備液(4.19)5 mL、0.5 mL至50 mL容量瓶中,用水溶解、定容,混勻。
4.21維生素B%(吡哆素、吡哆醛)混合標準系列工作液:分別準確吸取維生素B混合標準中間液2(4.20)0.1 mL.1.0 mL,混合標準中間液1(4.20)1.0 mL.5.0 mL,10.0 mL、20.0 mL至100 mL容量瓶中,用水溶解定容。該標準系列濃度分別為0.01 μg/mL、0.1 μg/mL.1.0 pμg/mL.5.0 μg/mL、10.0 μg/ mL. 20.0μg/mL。臨用前配制。
4.22微孔濾膜: 0.45 μm,有機相。
5儀器和設(shè)備
5.1高效液相色譜(HPLC)儀:配有熒光檢測器。
5.2 分析天平:感量為0.000 1 g和0.01 g.
5.3 渦旋混合器。
5.4水浴 振蕩器。
5.5 pH 計。
5.6具 塞塑料離心管:50 mL.
6分析步驟

檢測流程步驟

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